|
|
شنبه ۲۸ ارديبهشت ۱۳۹۲ ساعت ۰۹:۳۸
کد مطلب : 7992
شناسايي كامپيلوباكترهاي بيماريزاي روده اي در مدفوع مرغ ها با روش PCR و مقايسه آن با روش كشت
|
دكتر محمد بكائيان ، دكتر رسول صالحي ، دكتر شهرام شهركي زاهداني ، مظهر اقبال قريشي
امروزه كامپيلوباكترها از شايع ترين علل اسهال هاي باكتريايي در سرتاسر جهان محسوب مي شوند. در جنس كامپيلوباكتر 18 گونه و تحت گونه وجود دارد كه گونه هاي Campylobacter jejuni و Campylobacter coli مسبب اكثر عفونت هاي انساني ناشي از كامپيلوباكترها مي باشند و مهم ترين بيماري آنها نيز اسهال مي باشد. بيماري در انسان متعاقب مصرف آب و مواد غذايي بويژه گوشت ماكيان رخ دهد. تشخيص باكتريولوژيك اين باكتري با دشواري زيادي از قبيل طولاني بودن مدت انكوباسيون ومحدوديت تست هاي افتراقي همراه است. بنابراين استفاده از روش هاي ديگر تشخيصي امروزه مورد توجه قرار گرفته است. تعداد 116 نمونه ركتال سواپ از مرغ هاي موجود در مرغداري هاي شهر اصفهان گرفته شده و پس از 18-12 ساعت غني سازي در محيط Campy Thio، در محيط اختصاصي Campylobacter selective agar كشت شدند. براي شناسايي و تعيين گونه ها از رنگ آميزي گرم و تست ها اكسيداز، كاتالاز، هيدروليز هيپورات و سنجش حساسيت به ناليديسيك اسيد و سفالوتين استفاده شد. جهت استخراج DNA از كيت هاي اختصاصي استفاده شد و با استفاده ازپرايمرهاي ويژه گونه هاي ژژوني و كلي اقدام به انجام (Palymeras Chain Reaction) PCR گرديد. نتيجه كشت در 11 مورد مثبت بود (9.5%) كه از اين تعداد 8 مورد مربوط به گونه ژژوني و 3 مورد مربوط به گونه كلي بود. نتيجه PCR نمونه ها در 27 مورد مثبت بود (23.2%) كه از اين تعداد 18 مورد مربوط به گونه ژژوني و 9 مورد مربوط به گونه كلي بود حساسيت و ويژگي روش PCR در مقايسه با روش كشت به ترتيب 100 و 84.7 درصد بود. روش PCR مورد استفاده در اين تحقيق قادر به شناسايي تمام نمونه هاي كشت مثبت بود و نتايج تعيين گونه با اين روش تطابق كاملي با روش بيوشيميايي داشت. بنابراين با توجه به دقت بالا و سرعت زياد به نظر مي رسد روش PCR جايگزين مناسبي جهت كشت در تشخيص كامپيلوباكترها در نمونه هاي مرغ ها باشد.
کليدواژگان: كامپيلوباكتر ژژوني ، كامپيلوباكتر كلي ، واكنش زنجيره اي پليمراز (PCR) ، كشت ، ماكيان
