مجيد غلامي آهنگران و همكاران
تعيين تيپ و آناليز مولكولي ژن S1 ويروس برونشيت عفوني در جوجه هاي گوشتي استان اصفهان
۲۵ آبان ۱۳۹۰ ساعت ۰:۰۰
فاصله زماني تابستان 1385 تا تابستان 1386 از گله هاي جوجه گوشتي واجد سندرم تنفسي مشكوك به برونشيت عفوني در استان اصفهان با اخذ تاريخچه نمونه ناي اخذ شد . RNA ي ويروسي با كيت تخليص RNA استخراج شد و در واكنش RT-PCR يك مرحله اي با پرايمرهاي 2 uni 1 S و 2 XCE كه براي ويروسهاي برونشيت عفوني مشترك است، قطعه اي بطول 1200 جفت باز از ژن S 1 مورد تكثير قرار گرفت سپس محصول RT-PCR براي شناسايي و تفريق تيپهاي ماساچوست، 274 D و 4/91 به روش Nested PCR با پرايمرهاي اختصاصي تيپ، تكثير شد . درNested PCRسويه هاي رفرانس 274 D و 120 H ،4/91 با پرايمرهاي اختصاصي تيپ، بترتيب، قطعاتي به طول Nested PCR ،، پنج جدايه در RT-PCR جدايه شناسايي شده در 7 جفت باز توليد كردند . از 975 ، 295 و 217 قطعاتي به طول 295 جفت باز همانند سويه هاي رفرانس 120 H و 2 جدايه قطعا تي به طول 975 جفت باز همانند سويه رفرانس 4/91 توليد كردند . سپس قطعه 1650 جفت بازي از ژن 1 S سويه هاي مربوط به تيپ 4/91 و ماساچوست تعيين توالي شدند . نتايج تعيين توالي ضمن تائيد نتايج Nested PCR نشان داد سويه هاي متعلق به تيپ 4/91 شباهت بيشتري با سويه بيماريزاي 4/91 دارند و سويه متعلق به تيپ ماساچوست شباهت زيادي با سويه واكسنيH120 نشان مي دهد . علاوه براين، مقايسه توالي ژن S 1 سويه هاي 4/91 اصفهان با ساير سويه هاي رفرانس 4/91 نشان داد، سويه هاي اصفهان در برخي موقعيتهاي نوكلئوتيدي و اسيدآمينه اي منحصر بفرد مي باشند كه اهميت آنها بوضوح مشخص نيست . بهرحال، با تائيد حضور تيپ 4/91 در استان اصفهان و با توجه به اختلاف حدود 25 درصدي سويه هاي 4/91 اصفهان با سويه واكسني 120 H ، بنظر مي رسد براي كنترل برونشيت عفوني يك راهبرد واكسيناسيون مناسب لازم است
